细胞冻存是保存细胞的重要方法，通过低温技术减缓细胞的生命活动。这种方法不仅能够有效保存细胞，而且在需要时也能轻松复苏，以供各种生物医学实验使用。19世纪末，科学家们开始探讨低温对生物组织的影响。早期的研究发现，单纯的冷冻会导致细胞内部冰晶的形成以及渗透压失衡，从而引发细胞死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出了“冰晶损伤”理论，为后来的冷冻保护研究奠定了重要基础。

进入1949年，一位英国科学家在进行精子冷冻研究时意外发现，甘油可以显著提高冷冻后精子的存活率。甘油作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），能够有效进入细胞内部，降低冰点并减少冰晶的生成。它通过平衡细胞内外的渗透压，防止细胞在冷冻过程中因脱水而破裂。1959年，科学家进一步发现二甲基亚砜（DMSO）同样展现出优异的冷冻保护效果，尤其适用于哺乳动物细胞。DMSO的穿透性优于甘油，并且其毒性相对较低，迅速成为细胞冻存的标准保护剂之一。

1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”，指出在快速冷冻时细胞内的冰晶会破坏细胞膜和细胞器，而在慢速冷冻过程中，外部冰晶的形成会导致细胞脱水，从而使细胞内溶质浓度升高并产生化学毒性。这一理论为程序化慢冻法的实施提供了科学依据。在实验过程中，绝大多数细胞的冻存遵循“慢速冻存”的原则，通过程序降温设备控制降温速度（通常为1°C/min），使细胞在冷冻过程中逐步脱水，从而避免细胞内部的冰晶形成。这种方法显著提升了冻存细胞的存活率。

研究显示，5%-10%的DMSO最适合用于细胞冻存，但具体比例应根据细胞种类进行调整。对于对DMSO敏感的细胞，需降低其浓度。根据小尚的经验，8%DMSO适用于大多数细胞系。同时，还需根据细胞培养的难易程度调整血清的比例，培养较困难的细胞应增加血清的使用，过于脆弱的细胞可以采用血清+DMSO的组合冻存，而不添加培养基。常用的冻存液配方包括92%胎牛血清（FBS）和8%DMSO（适合新手）或92%完全培养基和8%DMSO（推荐给高手）。

值得推荐的是，尊龙凯时提供的特级胎牛血清呈浅黄色澄清且无溶血，经过各项检测确认无菌、无支原体、无噬菌体及相关牛源病毒，低内毒素（＜3EU/mL），不含外源激素、生长因子或抗生素，适用于肿瘤细胞、原代细胞及多种干细胞的培养。产品货号为SNS-002。

此外，尊龙凯时的非程序性细胞冻存液（货号：SNR-006）是一种无血清冻存液，可直接在超低温冰箱中存储，而无需逐步降温或使用程序化冷冻盒，从而极大地方便了细胞冻存操作，并减少了血清对细胞及实验的影响。

不论选择何种冻存液，都建议在正式冻存前进行冻检：即在冻存24小时后复苏一管，确认细胞状态正常后，再进行大批量的冻存。为防止因复苏失败导致细胞绝种，建议留存至少一瓶细胞培养。

关于我们：尊龙凯时（武汉尚恩生物技术有限公司）位于武汉东湖高新区光谷生物城，专注于细胞及相关产品的研发、生产和服务。我们拥有标准化的GMP实验室和动物房，通过了GB/T19001-2016/ISO9001:2015质量管理体系认证，并荣获高新技术企业等多项荣誉。公司主要研发并生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基及辅助试剂等一系列产品，提供细胞及培养配套产品的一站式采购服务，致力于为生物实验室、医学院、生物研究机构和相关诊断、制药公司提供高质量的细胞资源和相关试剂。尊龙凯时将持续追求卓越，为广大科研工作者提供更优质的产品和服务！