在细胞培养的领域中，细胞通常被分为两大类：贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞需要附着在培养皿上才能生长，而悬浮细胞则可以在液体培养基中自由漂浮与增殖。表面看来，似乎只有贴壁细胞才需要考虑培养皿的表面特性，比如是否需要包被胶原蛋白或多聚赖氨酸（poly-L-lysine，PLL）等物质来增强附着力。但是，如果你认为“悬浮细胞就不需要包被”——那你可能会被它们看似轻盈的外表所误导。实际上，在某些关键实验操作中，悬浮细胞可能也需要暂时“靠岸”，甚至依赖于包被表面的支持。那么，悬浮细胞何时需要包被呢？包被的具体方法又是怎样？

多聚赖氨酸（PLL）包被的概述

多聚赖氨酸（poly-L-lysine，PLL）作为一种人造阳离子多肽，富含氨基基团，整体带有正电荷。这使得PLL能够通过静电作用将细胞“吸附”在包被表面，广泛应用于：

• 初代神经元、干细胞等难贴壁细胞的培养
• 组织切片或细胞爬片的染色固定
• 增强某些表面抗体或细胞的结合力

在贴壁细胞中，PLL的包被可以提升细胞附着的速度与均匀性，而在悬浮细胞中，PLL更多用于短期固定与功能性实验结合。

悬浮细胞需要包被的常见场景

以下是悬浮细胞在实验中常见的几种需要包被的情况：

1. 免疫荧光成像与免疫染色：悬浮细胞在普通培养皿中容易在洗涤时被吸头吸走，或者漂移影响成像。使用PLL包被的培养皿能够实现短暂固定，从而提高图像稳定性和信噪比。
2. 电转染后细胞收集：电转后的悬浮细胞在恢复期常较脆弱。通过在PLL包被的培养板短暂培养4至6小时，使部分细胞附着后再进行回收，有助于提高后续转染效率以及活细胞比例。
3. 细胞富集或原位功能检测：某些实验需要在细胞“原位”观察反应，这类实验对细胞的分布和位置稳定性要求较高，因此常使用PLL或细胞外基质包被来固定悬浮细胞。
4. 悬浮细胞低密度培养的聚团问题：在低密度培养中，悬浮细胞可能因漂浮过快而无法扩增，或者形成异常聚团。适当的包被可帮助形成一些“锚点”，减少细胞间的漂浮干扰。
5. 外泌体/病毒收集实验的细胞定点处理：在外泌体研究中，有时会选择在轻度PLL包被的条件下固定悬浮细胞，以保持细胞分泌的稳定性，避免因漂浮密度的差异影响上清液的产物一致性。

如何正确使用PLL包被？

需要注意的是，悬浮细胞的包被并非为了让它们像贴壁细胞一样长期生长。大多数情况下，包被是为了：

• 实验窗口期的短暂固定
• 提高操作效率与成像质量
• 增强细胞在某些实验平台上的一致性

包被时间过长可能会对细胞状态产生不良影响，甚至改变它们的生物学特性。因此，务必根据实验目的合理设定处理时长和强度。

何时不应使用包被？

当然，并非所有悬浮细胞的实验都需要包被。以下情况应避免使用包被：

• 长期培养的悬浮细胞，如293F在生物反应器中的培养，不适合添加包被，而应采用低附着力的培养皿（如聚HEMA处理）
• 需要完全无附着状态的实验，如免疫学中的某些流式功能检测、抗体介导的细胞毒性测试等，包被可能影响结果的真实性

总结

悬浮细胞在特定情况下也需要“靠岸”。无论是为了成像、细胞收集、固定，还是维持操作的稳定性，适当的包被（如PLL）在关键步骤中能大幅提升实验的成功率与数据质量。记住，悬浮不等于永远漂浮，科学实验讲究适时适地，尊龙凯时品牌提供的专业解决方案，将能在关键时刻助你一臂之力。