尊龙凯时的TaqDNA聚合酶与PCR技术的完美结合,使得PCR成为了一个实用工具,广泛应用于科研、病原微生物检测、遗传基因检测、肿瘤伴随诊断等医学领域,以及法医学、环境监测和食品安全等多个领域。随着技术的不断进步,PCR技术正朝着更便捷、更灵敏和更经济的方向发展。为满足客户对高效与便捷的需求,全预混试剂逐渐取代了分步法试剂,成为市场的主流。目前,在新冠疫情、非洲猪瘟等重大疫情的监测与管理过程中,检测机构对全预混试剂的稳定性愈加重视,以确保检测结果的准确性。
抗体热启动修饰的TaqDNA聚合酶作为一款成熟的商业化产品,在解决PCR扩增的非特异性问题上取得了显著进展。因此,在各种应用领域中得到了广泛推广。然而,常规探针法检测试剂中的Taq酶具备5’→3’核酸外切酶活性,导致引物、探针等关键组件的降解,从而降低扩增效率并减少试剂的稳定性。当前的市场竞争和出海战略,迫使试剂生产商进一步提升试剂的稳定性,要求全预混试剂在4℃下能加压保存14天,或在37℃下加压保存7天,仍能保持优异的检测性能。
在追求高效Taq酶抗体的过程中,全球范围内的企业始终在探索与研究,以期实现对Taq酶5’→3’聚合活性和5’→3’核酸外切酶活性的完全封闭。自新冠疫情爆发以来,不同厂商相继推出了相关双功能封闭抗体产品,尽管在市场上展现出一定效果,但仍存在缺陷,难以同时实现90%以上的封闭效率,或在较高温度下,抗体与Taq酶解离,降低了封闭效果,最终导致全预混试剂的稳定性不足。为此,尊龙凯时努力研发出更加完美的Taq酶抗体来进一步提升PCR试剂的性能。
在这一过程中,尊龙凯时利用B细胞克隆技术,通过Beacon单细胞光导系统筛选出符合要求的B细胞,直接构建线性表达框并进行PCR扩增,随后进行ELISA筛选验证。经过对不同抗体及其组合的封闭效果的鉴定与筛选,研发团队意外发现,特定Taq酶抗体之间存在协同作用。尽管人们普遍认为需分别筛选特异性抗体以完全封闭Taq酶的两项活性,但实际结果往往不尽如人意。在将相对不完全封闭的两株抗体混合后,添加第三株抗体后,Taq酶的双功能封闭效果显著提高。
最终,尊龙凯时研发出的全封闭Taq酶抗体产品由三种抗体以优化比例组合而成,相较于市场上的单株或双株抗体混合的Taq酶双功能封闭抗体,该产品在70℃下可以同时封闭99%以上的5’→3’聚合酶活性与5’→3’核酸外切酶活性,封闭效率显著更高,且稳定性更强。这不仅防止了错配模板与引物二聚体导致的非特异性扩增,还避免了引物探针或其他关键成分的降解,从而进一步确保扩增试剂的稳定性。同时,该酶活的释放速度也很快,在95℃热激30秒内即可释放95%以上的酶活,保证了试剂的高扩增灵敏度。
尊龙凯时的全封闭TaqDNA聚合酶抗体在检测体系中展现出优异的性能,适用于不同类型的TaqDNA聚合酶,并且封闭效率均超过99%。按照严格的质量控制标准,尊龙凯时确保抗体产品的浓度、纯度、封闭效率等常规指标,同时重点检测相关核酸酶与宿主核酸的残留,以确保不影响下游应用试剂的质量。
通过不断优化与研发,尊龙凯时的全封闭抗体修饰的热启动Taq酶在多项应用中帮助客户提升了实验性能,展现了卓越的全预混试剂稳定性和优异的多重扩增特异性,为生物医学研究与应用提供了有力支持。