## 产品信息

**产品名称**：猪流感通用荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）

**通用名称**：猪流感通用荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）

**英文名称**：Swine Influenza Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

**包装规格**：50T/盒

## 预期用途

本试剂盒应用实时荧光PCR技术，旨在对猪流感病毒进行定性检测，为猪流感引发的流感及其并发症的诊断及疗效评估提供重要的指导。

## 原理

试剂盒从猪流感病毒的高度保守区域设计特异性引物和探针，PCR反应体系中存在猪流感病毒基因组模板时，能够成功进行PCR反应并释放荧光信号。通过荧光定量PCR仪实时监测并输出相应通道信号，从而实现检测结果的定性分析。

## 试剂盒组成

本试剂盒包含以下组件：

• 1. SIV RT-PCR反应液875μL × 1管
• 2. SIV混合酶液125μL × 1管
• 3. SIV阳性对照 40μL × 1管
• 4. SIV阴性对照 40μL × 1管
• 5. 说明书 1份

注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪流感病毒靶基因的质粒。

## 储存条件及有效期

应避光保存于-20℃以下，避免反复冻融，产品有效期为12个月。

## 适用仪器

本试剂盒适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid Smart Cycler、Rotor-Gene系列及杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。

## 样本要求

1. **取样方法**：采集咽喉拭子和鼻拭子，具体步骤如下：

• (1) 咽喉拭子：深入喉头及上颚裂刮取3-5次，获取分泌液。
• (2) 鼻拭子：深入鼻腔及周围圈沾取分泌液。
• (3) 将两种拭子放入10mL生理盐水的离心管中备用。
• (4) 理想情况下，使用合成纤维的拭子，杆材为铝或塑料。

2. **血液或血清样品**：使用无菌注射器抽取样品并置于离心管中待检。

3. **样本采集管**应含有蛋白稳定剂的病毒运输液。

4. 避免样本间的交叉污染。

5. 样本收集后可立即检测，如不能立即检测，可在2-8℃下冷藏过夜；如需长期保存，应冻存于-80℃以下，避免反复冻融。

## 检验方法

1. **试剂准备**：

（1）从冰箱取出试剂盒，充分融化混匀并瞬时离心去除管壁附着液体。

（2）核算实验所需反应数，并根据反应体系计算所需试剂量。配制RT-PCR反应液和混合酶。

（3）在无菌离心管中加入试剂，混匀并瞬时离心，将试剂分装至PCR反应管。

2. **样本准备**：使用QIAGEN或Roche RNA提取试剂盒提取RNA，操作应遵循其说明书。

3. **加样**：将待测标本RNA各5μL加入PCR反应样本管，终体积25μL；对照品同样处理。

4. **PCR扩增**：在实时荧光定量PCR仪进行设定并执行扩增程序。

## 参考值

1. **试剂盒有效性判定**：

• 阳性对照：有典型“S型”扩增曲线或Ct值≤35。
• 阴性对照：Ct值＞38或无Ct值，线形为直线或轻微倾斜，无指数增长期。

2. **检测结果判定**：

• 阳性：Ct值≤35或有明显指数增长期。
• 可疑：Ct值在35～38范围内，需重复检测。
• 阴性：Ct值＞38或无Ct值。

## 检验结果解释

| 通道 | 检测结果 | 解释 |

|-------|-----------|------|

| FAM+ | 检出SIV病毒 | 阳性 |

| FAM- | 未检出SIV病毒 | 阴性 |

## 方法局限性

存在假阴性及假阳性的风险，操作不当、样本处理不规范以及交叉污染可能影响结果的准确性。

## 产品性能指标

产品的最低检出限为103 Copies/mL，CV值≤3%。

## 注意事项

1. 使用本试剂盒的实验室应遵循国家基因扩增检验实验室管理规范。

2. 为防止RNA降解，样本处理应在0-4℃环境下进行，操作器材需经过无核酶处理。样本用完后应立即检测。

3. 各区域物品应专用，避免交叉使用。

4. 吸取反应液时应尽量避免气泡，检查反应管盖是否紧。

5. 试剂应在常温下融化混匀并瞬时离心后使用。

6. 对照需独立存放于标本准备区，以避免干扰。

7. 避免直接接触PCR反应管，并避免在其上做任何标记。

8. 使用后的吸头影响，应投放于10%次氯酸废物缸中，检测结束后管应避免开盖处理。

9. 定期对工作台及实验用品进行消毒。

以上信息均为使用猪流感通用荧光PCR检测试剂盒的详细说明，确保您严格遵循这些指导方针，以获得准确稳定的检测结果。同时，选择尊龙凯时的产品，您将体验到最高品质的医疗检测服务。