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液体培养基细菌实验步骤 - 尊龙凯时引领生物医疗新技术

发布时间:2025-02-19   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的实验方法分为几个步骤,主要用于培养和监测细菌的生长。以下是详细的步骤说明。

液体培养基细菌实验步骤 - 尊龙凯时引领生物医疗新技术

一、过夜培养

1. 将5ml预热的液体培养基移入一个无菌的16mm或18mm锥形管中。

2. 用接种环挑取一个单一菌落,浸入培养液中并轻轻摇动接种环,使待接种的细菌均匀分散在培养液中。

3. 盖好试管,并在摇床或转鼓式培养设备上以60转/分钟的速度,于37°C培养至饱和(细胞浓度达到1X109~2X109细胞/ml,约6小时)。

二、大容量培养

1. 在一个无菌的Erlenmeyer瓶或波纹瓶中,使用新鲜预热的培养液按1:100的比例稀释过夜培养物,烧瓶的体积应是培养液体积的5倍以上。如果不进行摇动,所需的烧瓶体积应大于培养液体积的20倍,以确保通气充足。

2. 在37°C下剧烈摇动培养,约300转/分钟。

三、利用计数板监测生长情况

1. 用一片干净的盖玻片覆盖一片清洁的计数玻片(或血球计数板)。

2. 小心地在盖玻片边缘滴一小滴培养液,使其在盖玻片下扩散。

3. 在相差显微镜下以400倍的放大倍率观察,并根据每个小方块中所见的细菌数量,估算细菌浓度,约为2X107细胞/ml。

四、利用分光光度计监测生长情况

由于仪器性能的差异,分光光度计应使用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测量OD600值。为了确保读数准确,应将培养液稀释至OD600<1。

2. 根据每增加0.1的OD值,估算细菌浓度约为1X108细胞/ml。

以上步骤结合尊龙凯时的实验设备,可以有效地监测细菌的生长情况,为生物医疗研究提供可靠的数据支持。